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Western Blot
Western印跡法（Western Blot）或稱免疫印跡法，常用于科研領(lǐng)域。利用抗體能夠特異性結(jié)合對(duì)應(yīng)抗原的原理來(lái)對(duì)樣品進(jìn)行著色，通過(guò)分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質(zhì)在所分析的細(xì)胞或組織中的表達(dá)情況的信息。
原理
Western 印跡法一般先通過(guò)PAGE分離蛋白質(zhì)樣品，再轉(zhuǎn)移到固相載體（例如硝酸纖維素膜）上，固相載體以非共價(jià)形式吸附蛋白質(zhì)。使用合適的封閉劑封閉固相載體上的空余位置，再使用特異性結(jié)合目標(biāo)蛋白的抗體（一抗）孵育，洗去多余一抗后用標(biāo)記二抗標(biāo)記、顯色，達(dá)到檢測(cè)經(jīng)電泳分離的目標(biāo)蛋白成分。其中標(biāo)記二抗的方法主要有放射性標(biāo)記、酶聯(lián)標(biāo)記以及熒光標(biāo)記。
QD-Western
量子點(diǎn)作為新型熒光納米材料，具有熒光效率高、穩(wěn)定性高、Stockes位移較大、發(fā)射光譜窄而對(duì)稱、單一波長(zhǎng)多色激發(fā)等諸多優(yōu)秀的熒光特性。使用量子點(diǎn)熒光標(biāo)記產(chǎn)品進(jìn)行Western印跡實(shí)驗(yàn)（QD-Western），相比于ECL方法或普通熒光染料染色，無(wú)需顯色操作便可輕松實(shí)現(xiàn)多元檢測(cè)，簡(jiǎn)化操作，提高了檢測(cè)靈敏度。當(dāng)使用紅色量子點(diǎn)標(biāo)記二抗時(shí)可使用普通凝膠成像儀（常用于觀察DNA溴化乙錠染色）直接成像記錄，更易于實(shí)現(xiàn)高靈敏、定量Western印跡檢測(cè)。多色檢測(cè)時(shí)350nnm~450nm波長(zhǎng)的紫外燈均可有效激發(fā)，使用濾光片或直接使用彩色攝像頭拍攝。
QD-Western印跡實(shí)例：
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圖1，A蛋白的QD-Western印跡。 點(diǎn)樣順序左起：大腸桿菌裂菌液、酵母表達(dá)上清液、目標(biāo)A蛋白、表達(dá)目標(biāo)A蛋白的大腸桿菌裂菌液、蛋白Marker，以及1、0.5、0.1、0.02μg的目標(biāo)A蛋白。上圖為考馬斯亮藍(lán)染色的PAGE照片（使用普通凝膠成像儀，白光模式），下圖為相應(yīng)鼠單抗和QD標(biāo)記的羊抗鼠二抗（Cat: Q2104/ Q2104a）顯色的結(jié)果（使用數(shù)碼相機(jī)，加裝紅色濾光片）。
結(jié)果顯示QD-Western對(duì)大腸桿菌裂菌液和酵母表達(dá)上清液都沒(méi)有非特異性，特異性檢測(cè)目標(biāo)A蛋白。 |
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相關(guān)產(chǎn)品：
量子點(diǎn)標(biāo)記試劑盒
定制標(biāo)記服務(wù)
Goat Anti-Mouse IgG-QD605 Cat: Q2104/ Q2104a
Protein A-QD625 Cat: Q1205/Q1205a
Protein A-QD525 Cat: Q1201/Q1201a
Streptavidin-QD605 Cat: Q1104/Q1104a
Goat Anti-Mouse IgG-Biotin Cat: B-AM01/B-AM01a
Goat Anti-Mouse IgG Cat: AM01/AM01a/AM01b
降鈣素原（PCT） Cat: ATH301
